Contribution à l'étude de la régénération du Genévrier thurifère (Juniperus thurifera L.) par la production de plants in vitro

Abstract

العرعار الباخوري هو كوبريساسي متوطن في جبال الاوراس، شرق الجزائر، و هو نوع من الانواع المهددة بالانقراض بسبب ندرة البذورالقابلة للانتاش. و علاوة على ذلك، هذا النوع مهدد بعوامل حيوية اخرى، و عدم وجود تسيير فعال لهذه الشجرة الهامة هي من العوامل التي تسرع الانقراض. في هذه الدراسة تم استنساخ بروتوكول نظام التكاثر الدقيق باستعمال البراعم الجانبية التي تم زرعها في اوساط مختلفة و مكملة بانظمة النمو بتركيزات و تركيبات مختلفة. تم الحصول على اكبر عدد من البراعم و الفروع في الوسط PMW و 2.4D ملغ/ل من 0.25 و BAP ملغ/ل من 0.5 او 1 ملغ/ل من D2.4 0.25 و BAP ملغ/ل من 0.5 مكمل ب WPM افضل نسبة استطالة للبراعم تمت في الوسط و قد تم تحقيق مزيد من التكاثر في عملية الزرع المتكررة للبراعم. علاوة على ذلك تم التوصل الى تجذير البراعم في المختبر بنسبة (38.75%) في الوسط (SM) مع نصف تركيز قوة الاملاح مع زيادة 5 ملغ/ل من حمض النفطالين AAN و BIA. النباتات تاقلمت بنسبة 50% بعد تحويلها الى التربة. ثانيا بالنسبة للتكاثر العضوي، افضل النتائج المتعلقة بالكالوسات المتحصل عليها من اجزاء البراعم لوحظ في الوسط MPW مكمل ب PAB و D2.4 مع التركيبة (0.5 ملغ/ل+0.25 ملغ/ل) او (0.25 ملغ/ل+0.25 ملغ/ل) و قد استحثت بدء عملية التطور الجنيني الجسدية و يبدو انها واعدة عند العرعار الباخوري في اعقاب استخدام وسط غذائي WPM يفتقر الى منظمات النمو. و مع ذلك، فان ظروف الاستزراع في المختبر لم تسمح بتطور التراكيب الجنينية في المرحلة حيث توقفنا اختباراتنا. ان البروتوكول الذي تم تطويره كجزء من بحثنا هو وسيلة عملية لكل من الاكثار الدقيق للعرعار الباخوري و حفظه. Juniperus thurifera L. est une espèce de la famille des Cupressaceae. En Algérie, elle est endémique des montagnes des Aurès et est menacée d'extinction en raison de plusieurs facteurs biotiques. Cependant, la faible régénération et la pénurie de graines viables sont les causes principales. En outre, le manque d'un plan de gestion intégrée de cet arbre accentue cette situation. Pour contribuer à sa préservation, nous avons développé un protocole de micropropagation in vitro. Les microboutures avec bourgeons axillaires ont été cultivées sur différents milieux additionnés de régulateurs de croissance végétale avec différentes combinaisons et concentrations. Le plus grand nombre de pousses et de branches, régénérées à partir de pousses originales, à été obtenu sur Woody Plants Medium (WPM) additionné de 6-benzylaminopurine (BAP) (0.5 mg/l) et de 2.4-dichlorophénoxyacétique (2.4D) (0.25 mg/l). Les meilleurs taux d'allongements des pousses ont été obtenus sur (WPM) additionné de 0.5 mg/l de (BAP) et de 0.25 mg/l ou 1 mg/l de 2.4D. La subculture a eu un taux plus élevé de nombre de pousses et de branches que celles de la première culture. Le taux d'enracinement le plus élevé, 38.75%, a été obtenu avec des pousses cultivées sur le milieu 1/2 MS additionné de 5 mg/l de l'acide indol-3butyrique (AIB) et de l'acide acétique naphtalène (ANA). De même, le nombre de racines le plus élevé ainsi que la longueur de racines ont été produits en millieu 1/2 MS complété par l'AIB et l'ANA (5 mg/l pour chacun). Pendant le transfert des plantules à l'acclimatation, des taux élevés de pertes végétales, environ 50%, se sont produits. La deuxième partie de l'expérience a montré que la meilleure induction des calls à partir des pousses a été observée sur un millieu WPM complété par le BAP et le 2.4D avec soit la combinaison (0.5mg/l + 0.25mg/l) ou (0.25mg/l + 0.25mg/l) et l'initiation d'une embryogenèse somatique a été induite et semble être prometteuses chez le Genévrier thurifèresuite à l'utilisation du milieu de culture WPM dépourvu des régulateurs de croissance. Cependant, les conditions de culture in vitro testées n'ont pas permis l'évolution des structures proembryonaires au stade où nous avons arrêté nos essais. Le protocole développé et mis au point dans le cadre de notre recherche constitue un moyen pratique aussi bien pour la micropropagation de J. thurifera que pour sa conservation.