Etudes des mycoplasmoses respiratoires bovines dans l'Est Algérien

Abstract

À ce jour, aucune infection à Mycoplasma bovis n’a été signalée chez les veaux en Algérie. Il est important de surveiller sa séroprévalence sur le terrain. La présence d’anticorps spécifiques contre M. bovis dans le sérum des veaux est étudiée dans la présente étude. Au total 351 échantillons de sérum de veaux malades et cliniquement sains ont été examinés. Un kit commercial ELISA (ID Screen® ELISA) pour le diagnostic des anticorps de M. bovis dans des échantillons de sérum, a été utilisé. Des anticorps spécifiques contre M. bovis ont été identifiés dans 241 des 351 échantillons (69%). La séroprévalence observée est la preuve de la présence de M. bovis chez les veaux dans différents élevages de l’est Algérien. Le second objectif de la présente étude est de déterminer la présence de M. bovis et de caractériser les souches isolées. Des lavages broncho-alvéolaires (LBA) ont été recueillis chez 176 veaux malades dans 60 troupeaux pour la détection de M. bovis par PCR en temps réel et culture. M. bovis a été détecté dans 102 LBA (58%) par rt-PCR et dans 84 cultures (48%). À partir des cultures positives, 53 clones ont été identifiés et sous-typés avec 2 méthodes : le schéma polC utilisé en France et la MLST internationale. Une très large diversité génétique a été observée parmi les clones. Aucun sous-type n’était prédominant. De nouveaux allèles et sous-types ont été déterminés, prouvant ainsi la grande diversité de M. bovis, en particulier en Algérie. La CMI de 5 antibiotiques a été déterminée sur un panel de 45 clones algériens. La totalité des clones étaient résistants à l’oxytétracycline et intermédiaires au florfénicol, la majorité des clones (32/45) étaient sensibles à la spectinomycine alors qu’elles étaient principalement intermédiaires ou résistantes à la tylosine. La majorité des souches étaient sensibles à l’enrofloxacine (33/45), mais un nombre non négligeable de clones étaient résistants. En conclusion, M. bovis circule chez les veaux souffrant de bronchopneumonies en Algérie et montre une diversité génétique et phénotypique plus importante que dans d’autres pays. To date, no Mycoplasma bovis infection has been reported in calves in Algeria. It is important to monitor seroprevalence in the field. The presence of specific antibodies against M. bovis in calf serum is investigated in this study. A total of 351 blood serum samples from diseased and clinically healthy calves were examined. A commercial ELISA kit (ID Screen® ELISA) for the diagnosis of M. bovis antibodies in blood serum samples was used. Specific antibodies against M. bovis were identified in 241 of 351 samples (69%). The seroprevalence revealed is an evidence of the presence of M. bovis in calves in various herds in eastern Algeria. The second interest of this study was to determine the presence of M. bovis and to characterize the isolated strains. Broncho alveolar lavage fluids (BALF) were collected in 176 diseased calves in 60 herds for the detection of M. bovis by real time-PCR and culture. M. bovis was detected in 102 BALF (58%) by rt-PCR and in 84 cultures (48%), From the positive cultures, 53 M. bovis’ clones were identified and characterized. Two subtyping methods were used: the polC scheme used in France and the international MLST. A great genetic diversity was observed between clones. There was no predominant subtype. New alleles and new subtypes were defined, proving the large diversity of M. bovis, especially in Algeria. The MIC of 5 antimicrobials was determined on a panel of 45 Algerian clones. All the clones were resistant to oxytetracycline and intermediate to florfenicol. The majority of the strains (32/45) were susceptible to spectinomycin while they were mainly intermediate or resistant to tylosin. The majority of strains were susceptible to enrofloxacin (33/45), but a significant number of strains were resistant. In conclusion M. bovis circulates in calves suffering from bronchopneumonia in Algeria and shows a greater genetic and phenotypic diversity than elsewhere in the world. لحد الآن، لم يتم الإبلاغ عن أي إصابة بميكوبلازما الأبقار لدى العجول في الجزائر. من المهم مراقبة الانتشار المصلي في هذا المجال. تم في هذه الدراسة التحقق من وجود أجسام مضادة محددة ضد M. bovis في مصل العجل. تم فحص 351 عينة مصل من عجول مريضة و صحية سريريا . تم استخدام مجموعة ELISA التجارية (ID Screen® ELISA) لتشخيص الأجسام المضادة ل M. bovis في عينات المصل. تم تحديد أجسام مضادة محددة ضد M. bovis في 241 عينة من 351 ٪96 . الانتشار المصلي الذي لوحظ هو دليل على وجود M. bovis في العجول في مزارع مختلفة في شرق الجزائر . الهدف الثاني من هذه الدراسة هو تحديد وجود M. bovis و تمييز السلالات المعزولة. تم جمع غسيل القصبات الهوائية (BALs) من 176 عجولا مريضة في 60 قطيعا للكشف عن M. bovis عن طريق تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) في الوقت الحقيقي و الزرع. تم الكشف عن M. bovis في 102 BAL (58 ٪ ) بواسطة rt-PCR و في 84 مزرعة (48 ٪). من الأوساط الزراعية الموجبة، تم تحديد 53 استنساخا و فرزها بطريقتين: مخطط polC المستخدم في فرنسا و MLST الدولي. لوحظ تنوع جيني واسع للغاية بين الحيوانات المستنسخة. لم يكن هناك نوع فرعي سائد . تم تحديد أليلات و أنواع فرعية جديدة، مما يثبت التنوع الكبير في M. bovis خاصة في الجزائر. تم تحديد MIC المكون من 5 مضادات حيوية على لوحة من 45 مستنسخة جزائرية. كانت جميع الحيوانات المستنسخة مقاومة للأوكسيتتراسيكلين و الوسيطة للفلورفينيكول، و كانت غالبية الحيوانات المستنسخة 45/32 حساسة للسبكتينوميسين، بينما كانت في الأساس نسبيا أو مقاومة للتيلوزين. كانت غالبية 45/33 لكن عددا كبيرا من الحيوانات المستنسخة كانت مقاومة / السلالات حساسة للإينروفلوكساسين. في الختام، ينتشر M. bovis في العجول التي تعاني من الالتهاب الرئوي القصبي في الجزائر و يظهر تنو عا وراثيا و ظاهريا أكبر مما هو عليه في البلدان الأخرى .